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本试剂盒基于性能卓越的热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶，用于模板DNA或RNA的染料法实时荧光LAMP恒温扩增反应，试剂盒中的5×IsoAmpMix包含了dNTP、Mg²⁺、反应缓冲盐，不含甘油。

• Bst4.3包含热启动Aptamer，该配体确保酶在<30℃时，酶活封闭效率>90%，在>60℃时1min内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系，并大幅降低了低温条件下的非特异扩增；
  
• 反应温度提升到70℃，大幅降低引物Dimer的形成，提高扩增特异性，并使得粗样品核酸释放更加充分；
  
• 包含解旋因子Uver，因此，允许在不使用F3/B3引物的情况下进行eLAMP扩增（easy LAMP），并允许FIP/BIP的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增，并使得扩增均一性大幅提升。

• Bst4.3聚合酶在用于LAMP扩增时的推荐反应温度为70℃。由于Uver的反应温度为70℃，因此该酶在65℃扩增时，性能会大幅下降。
  
• 制品中包含高浓度的盐组分，使用时做好个人防护，防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入，一旦接触或吸入，请用大量的清水冲洗。
  
• 防止气溶胶污染，尽可能进行分区操作。
  
• 在进行SYBR Green实时荧光LAMP时，取20μL的250×SYBR Green加入到1mL的5×IsoAmpMix中，即可用于后续测试（请注意在管上做好标记，已加入SYBR Green）。250×SYBR Green溶剂为DMSO，在常温以下为固态，可于37℃下彻底融化后使用。加入SYBR Green后的5×IsoAmpMix可于-20℃下保存12个月。
  
• 本试剂盒不仅可用于常规检测，对于具有冻干经验的研究者，在加入冻干保护剂后，可用于后续冻干。

• 10×LAMP Primer Mix的配制：
  

  	标准LAMP	eLAMP
  FIP/BIP	16μM each	8～16μM each
  LF/LB	4～8μM each	4～8μM each
  F3/B3	2μM each	非必须

  • eLAMP（easy LAMP）为去除F3/B3引物的方法，为Bst4.3-3.2系列专用的使用策略，对于大多数引物组，在Uver的加持下，扩增速度几乎不受影响。
• 配制LAMP反应体系：
  

  成分	用量
  5×IsoAmpMix	5μL
  10×LAMP Primer Mix	2.5μL
  热启动Bst4.3 DNA/RNA聚合酶(16U/μL)	0.25～0.5μL
  模板DNA/RNA	X μL
  ddH2O	至25μL

  • 关于Bst酶的用量，对于绝大多数的LAMP扩增来讲，0.16～0.32U/μl的浓度，均可获得理想的扩增结果，必要情况下进行其它调整。
• 扩增反应：反应体系配好后，置于70℃反应20～40min。